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DNA核酸免提取試劑盒

簡要描述:病毒DNA核酸免提取試劑盒

試劑盒應(yīng)用
本試劑盒采用zhuan利裂解液配方,有針對性的從組織、培養(yǎng)細(xì)胞、拭子、血液、尿液、唾液、環(huán)境樣本中獲得病毒DNA。裂解、提取和純化只需10分鐘。使用高效硅基DNA純化柱,高效結(jié)合基因組DNA,從而獲得純度高,產(chǎn)量高的基因組DNA。提取的基因組DNA完整性高,適合PCR、qPCR、酶切、克隆等。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2023-04-27
  • 訪  問  量:906
詳情介紹

病毒DNA核酸免提取試劑盒

 

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用zhuan利裂解液配方,有針對性的從組織、培養(yǎng)細(xì)胞、拭子、血液、尿液、唾液、環(huán)境樣本中獲得病毒DNA。裂解、提取和純化只需10分鐘。使用高效硅基DNA純化柱,高效結(jié)合基因組DNA,從而獲得純度高,產(chǎn)量高的基因組DNA。提取的基因組DNA完整性高,適合PCRqPCR、酶切、克隆等。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

 

試劑盒組成

組分

Col-D060150T

編號

裂解液DV

35 mL

Col-D0601A

洗滌液DVI

25 mL

Col-D0601B

洗滌液DVII

12 mL

Col-D0601C

洗脫液DV

5 mL


DNA吸附柱

50

Col-D0601E

備注:第一次使用前,在洗滌液DVII中加入48mL無水乙醇,并標(biāo)記"和時(shí)間,避免重復(fù)加入。

 

保存條件

室溫保存一年

 

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇、無DNase和無RNase離心管

 

使用方法

1. 樣本處理方法

1.1 從動(dòng)物組織中提取

1.1.1 20-100mg組織樣本放入液氮中充分研磨,加入700μL裂解液DV顛倒混勻。

或者20-100mg組織樣本加入700μL裂解液DV,加入1顆鋼珠,放入組織研磨器中,研磨1-2分鐘。

1.1.2 55℃孵育1分鐘。12,000rpm離心1分鐘。

1.1.3 500μL上清加入250μL無水乙醇,充分混勻。按照步驟2.1-2.7進(jìn)行操作。

 

1.2 從懸浮細(xì)胞中提取

1.2.1 細(xì)胞1,000rpm離心5分鐘,收集細(xì)胞沉淀。

1.2.2 細(xì)胞數(shù)量<5×106個(gè)時(shí),加入500μL裂解液DV。細(xì)胞數(shù)量為5×106~1×107個(gè)時(shí),加入700μL裂解液DC。輕輕吹打混勻,55℃孵育1分鐘。

1.2.3 12,000rpm離心1分鐘。

1.2.4 細(xì)胞數(shù)量<5×106個(gè)時(shí),450μL上清。細(xì)胞數(shù)量為5×106~1×107個(gè)時(shí),650μL上清。

1.2.5 加入0.5倍體積無水乙醇,充分混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

 

1.3 從貼壁細(xì)胞中提取

1.3.1 yimei消化細(xì)胞后1,000rpm離心5分鐘,收集細(xì)胞沉淀。

1.3.2 細(xì)胞數(shù)量<5×106個(gè)時(shí),加入500μL裂解液DV。細(xì)胞數(shù)量為5×106~1×107個(gè)時(shí),加入700μL裂解液C。輕輕吹打混勻,55℃孵育1分鐘。

1.3.3 12,000rpm離心1分鐘。

1.3.4 細(xì)胞數(shù)量<5×106個(gè)時(shí),450μL上清。細(xì)胞數(shù)量為5×106~1×107個(gè)時(shí),650μL上清。

1.3.5 加入0.5倍體積無水乙醇,充分混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

 

1.4 從血液、尿液、唾液、細(xì)胞上清液中提取

1.4.1 300μL樣本中加入500μL裂解液DV。顛倒混勻,55℃孵育1分鐘

1.4.2 加入400μL無水乙醇,上下顛倒混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

 

1.5 從拭子中提取

1.5.1 拭子置于700μL裂解液DV中,顛倒混勻,55℃孵育1分鐘。

1.5.2 加入350μL無水乙醇,上下顛倒混勻。按照步驟2.1-2.7操作。

 

2. 提取步驟

2.1 全部加入DNA吸附柱中(如有需要可離心兩次)12,000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中廢液。

2.2 DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DVI12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

2.3 DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DVII12,000rpm離心30秒,倒掉收集管中廢液。

2.4 重復(fù)步驟2.3一次。

2.5 12,000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。

2.6 DNA吸附柱放入新DNase和無RNase離心管,加入30-50μL 洗脫液DV,室溫放置1分鐘。

2.7 12,000rpm離心2分鐘,得到DNA溶液,-80℃保存。

 

注意事項(xiàng)

1. 經(jīng)常更換手套,防止DNA污染。

2. 使用無DNaseRNase的吸頭和離心管,防止DNA降解。

3. 常更換吸頭,防止交叉污染。

4. 動(dòng)作輕柔,防止基因組DNA斷裂。

5. 為了提高洗脫效率,可提前將洗脫液C置于65℃水浴后再使用。

 

 


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